紫外可见光分光计使用方法

紫外可见光分光计使用方法

一、前言：

紫外可见分光光度计是分析测试实验室里常见的一种分析仪器，属于光学仪器的一种，可广泛应用于医疗卫生、化学化工、环保、地质、机械、冶金、石油、食品、生物、材料、计量科学、农业、林业、渔业等领域中的科研、教学等各个方面，用来进行定性分析、纯度检查、结构分析、络合物组成及稳定常数的测定、反应动力学研究等。

二、紫外可见分光光度计的工作原理

1、紫外可见分光光度计基本工作原理和红外光谱仪相似，利用一定频率的紫外可见光照射被分析的有机物质，引起分子中价电子的跃迁，它将有选择地被吸收。一组吸收随波长而变化的光谱，反映了试样的特征。

2、紫外可见光的范围内，对于一个特定的波长，吸收的程度正比于试样中该成分的浓度，因此测量光谱可以进行定性分析，而且根据吸收与已知浓度的标样的比较，还能进行定量分析。

三、紫外可见分光光度计的操作

1. 掀开外边的保护罩，打开电源开关，仪器进入初始化状态，自动进行检测。

2. 初始化完成后，仪器进入主界面，按“波长”键入所需测定的波长数，按“100%/0A”自动校零。

3. 打开样品室盖子，把装有空白和待测样品的比色皿依次放入比色皿样品室里的架子里。

4. 按“开始”键进行测试，直接读数记录数据

5. 测定完毕后，盖上样品室盖子，关闭电源，盖上防护罩。

三、紫外可见分光光度计数据计算方法

朗伯比尔定律(Lambert-Beer law)是分光光度法的基本定律，是描述物质对某一波长光吸收的强弱与吸光物质的浓度及其液层厚度间的关系。

比尔—朗伯定律数学表达式：

A=lg(1/T)=Kbc

A为吸光度,T为透射比(透光度),是出射光强度（I）比入射光强度(I0).

K为摩尔吸光系数.它与吸收物质的性质及入射光的波长λ有关.

c为吸光物质的浓度,单位为mol/L，b为吸收层厚度，单位为.

简单来说，即通过吸光度的变化来反映物质浓度的变化（注意：适用范围为低浓度，一般吸光度不超过2）

如：初始浓度吸光度为1，反应结束吸光度为0.4，即反应过程浓度降低了60%。

四、注意事项

1、紫外可见分光光度计在开机前将样品室内的干燥剂取出，仪器自检过程中禁止打开样品室盖。

2、禁止将试剂或液体物质放在仪器的表面上，如有溶液溢出或其它原因将样品槽弄脏，要尽可能及时清理干净。

3、比色皿内溶液以皿高的2/3～4/5为宜，不可过满以防液体溢出腐蚀仪器。测定时应保持比色皿清洁，池壁上液滴应用擦镜纸擦干，切勿用手捏透光面。测定紫外波长时，需选用石英比色皿。

4、实验结束后将比色皿中的溶液倒尽，然后用蒸馏水或有机溶剂冲洗比色皿至干净，倒立晾干。关电源将干燥剂放入样品室内，盖上防尘罩。